Penelitian tentang uji aktivitas antibakteri ekstrak air daun kembang bulan (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray ) telah dilakukan terhadap bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak air daun kembang bulan terhadap pertumbuhan bakteri MRSA pada konsentrasi 10, 20, 30, 40, dan 50%. Ekstrak diperoleh menggunakan metode maserasi, dan pengujian aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi sumuran. Hasil karakterisasi simplisia daun kembang bulan diperoleh kadar air 9%, kadar sari larut air 21,6%, kadar sari larut etanol 10,3% dan kadar abu total 14,36%. Hasil karakterisasi ekstrak air daun kembang bulan diperoleh kadar air 26,36%, kadar sari larut air 53,13%, kadar sari larut etanol 26,36% dan kadar abu total 19,98%. Uji fitokimia menunjukkan ekstrak air daun kembang bulan mengandung metabolit sekunder golongan alkaloid, flavonoid, tanin, dan saponin. Diameter zona hambat terbesar adalah pada konsentrasi 50% sebesar 12,40 mm. Kesimpulan dari penelitian ini menunjukkan ekstrak air daun kembang bulan mampu menghambat pertumbuhan bakteri MRSA. Kata kunci : Antibakteri, ekstrak air daun kembang bulan, Methicillin Resistant Staphylococcus aureus, Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray