Umbi janeng (Dioscorea hispida Dennst.) tidak banyak dimanfaatkan karena kandungan racunnya. Pada penelitian ini dilakukan ekstraksi inulin dari umbi janeng dan uji aktivitasnya sebagai prebiotik. Ektraksi inulin dilakukan dengan metode pengendapan etanol. Rendemen inulin yang diperoleh sebesar 4%. Penentuan kadar inulin dilakukan menggunakan HPLC, diperoleh sebesar 0,11 % (b/v). Ekstrak inulin memiliki kelarutan dalam air sebesar 98,64%, daya serap air sebesar 16,60% dan kadar air sebesar 16,69%. Viskositas ekstrak inulin meningkat dengan peningkatan suhu. Penentuan aktivitas prebiotik ekstrak inulin dilakukan terhadap bakteri Lactobacillus acidophilus, diperoleh sebesar 0,325.