ABSTRAK Pemisahan spermatozoa merupakan salah satu upaya efisiensi dalam mengubah rasio spermatozoa pembawa kromosom X dan Y. Salah satu teknik pemisahan yang telah dilakukan adalah metode elektrik. Penelitian ini bertujuan untuk melihat tingkat keberhasilan sexing spermatozoa sapi aceh menggunakan metode elektrik dengan voltase yang berbeda dalam media sitrat kuning telur. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan pola satu arah terdiri atas tiga perlakuan voltase yaitu kontrol (P1), 1,5 volt ( P2), dan 3 volt (P3), dengan enam kali pengulangan. Parameter yang dilihat pada penelitian ini meliputi jumlah spermatozoa kromosom X dan kromosom Y pada anoda dan katoda, yang diamati yaitu perbedaan morfometrik kepala spermatozoa. Data yang diperoleh dianalisis dengan analysis of varian (ANOVA) dan dilanjutkan dengan uji Duncan. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa terdapat perbedaan nyata (P