Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A. actinomycetemcomitans) merupakan flora normal rongga mulut yang dapat menyebabkan periodontitis agresif. Daun pandan wangi merupakan tanaman yang telah lama dikenal oleh masyarakat Indonesia dan diketahui memiliki kandungan aktif yang bersifat antibakteri. Zat aktif yang terkandung tersebut adalah alkaloid, flavonoid, tanin, polifenol, dan saponin. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek antibakteri ekstrak daun pandan wangi terhadap pertumbuhan A. actinomycetemcomitans secara in vitro. Penelitian eksperimental laboratoris ini menggunakan sampel A. actinomycetemcomitans isolat klinis dan daun pandan wangi yang diekstraksi menggunakan metode maserasi. Ekstrak daun pandan wangi diuji aktifitas antibakterinya terhadap pertumbuhan A. actinomycetemcomitans dengan metode Standard Plate Count (SPC). Hasil analisis statistik one way ANOVA menunjukkan nilai p=0,00 yang berarti ekstrak daun pandan wangi berpengaruh signifikan terhadap pertumbuhan A. actinomycetemcomitans. Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan ekstrak daun pandan wangi memiliki aktifitas antibakteri terhadap pertumbuhan A. actinomycetemcomitans dengan Konsentrasi Hambat Minimum adalah pada konsentrasi 10%. Konsentrasi Bunuh Minimum tidak terlihat pada penelitian ini sampai konsentrasi ekstrak 50%. Kata kunci : antibakteri, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, daun pandan wangi