Ruang Rawat Inap Bedah Ortopedi Rumah Sakit Umum Daerah dr. Zainoel Abidin (RSUDZA) Banda Aceh merupakan salah satu ruang yang memungkinkan terjadinya Healthcare Associated Infections (HAIs). Mikroba udara merupakan salah satu faktor yang berpotensi menyebabkan HAIs. Penelitian ini bertujuan untuk menilai indeks angka kuman udara pada Ruang Rawat Inap Bedah Ortopedi RSUDZA Banda Aceh. Jenis penelitian ini adalah deskriptif dengan pendekatan observasional laboratorium. Metode penelitian yang digunakan adalah Passive Air Sampling yaitu pengambilan sampel dengan membiarkan sebanyak 27 cawan petri yang berisi media plate count agar (PCA) terbuka selama 1 jam. Cawan petri diletakkan setinggi 1 meter dari lantai dan jarak 1 meter dari benda sekitar. Sampel diinkubasi pada suhu 37˚C selama 24 jam dan koloni yang tumbuh dilakukan penghitungan. Hasil penghitungan dikonversikan ke dalam satuan CFU/m3 menggunakan rumus Omelianski. Selanjutnya nilai disesuaikan dengan standar yang ditetapkan oleh Kepmenkes RI No.1204/Menkes/SK/X/2004 mengenai indeks angka kuman udara di ruang perawatan. Hasil penelitian menunjukkan tingginya angka mikroba udara di Ruang Rawat Inap Bedah Ortopedi RSUDZA Banda Aceh yang melebihi standar yaitu >500 CFU/m3. Kata kunci: Healthcare Associated Infections (HAIs), indeks kuman udara, Ruang Rawat Inap Bedah Ortopedi, Passive Air Sampling.