ABSTRAK Penelitian mengenai sponga laut Indonesia Callyspongia sp. sebagai anti bakteri resisten Escherichia coli telah selesai dilakukan pada bulan November 2017 - Januari 2018 di Laboratorium Kimia Laut, Fakultas Kelautan dan Perikanan, Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran, Laboratorium Intrumen Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan, Universitas Syiah Kuala. Penelitian ini bertujuan untuk ekstraksi, isolasi, karakterisasi serta uji bioaktivitas terhadap bakteri resisten Escherichia coli. Metabolit sekunder yang aktif bioaktivitasnya diisolasi berdasarkan bioaktivitas dengan beberapa tahapan kromatografi. Hasil dari interpretasi data spektrum FTIR menunjukkan metabolit bioaktif memiliki gugus fungsi C-N imina pada bilangan gelombang 1637,4 cm-1 konfirmasi dari daerah fingerprint serapan bilangan gelombang 1407,2 cm-1. Berdasarkan hasil data FTIR mengindikasikan bahwa senyawa metabolit aktif merupakan senyawa alkaloid. Hasil uji bioaktivitas terhadap bakteri resisten Escherichia coli menunjukkan zona hambat pada konsentrasi 20 µg/mL memiliki diameter zona hambat 7 mm dan pada konsentrasi 100 µg/mL memiliki diameter zona hambat 8,25 mm, sedangkan zona hambat kontrol positif kloramfenikol pada konsentrasi 35 µg/mL memiliki diameter zona hambat 7,5 mm. Berdasarkan hasil uji bioaktivitas menunjukkan senyawa alkaloid dari sponga laut Indonesia Callyspongia sp. memiliki potensi aktivitas sebagai antibakteri resisten terhadap bakteri Escherichia coli. Kata Kunci : Alkaloid, Callyspongia sp., Escherichia coli, Antibakteri resisten