Penelitian uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah rambutan Aceh (Nephelium lappaceum L.) telah dilakukan terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Ekstrak etanol kulit buah rambutan diperoleh dengan menggunakan metode maserasi. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi cakram pada variasi konsentrasi ekstrak 0,5; 1; 5; 10; 20 dan 30%. Hasil karakterisasi simplisia kulit buah rambutan diperoleh kadar air sebesar 3,68%, kadar abu total 2,01%, kadar sari larut air 35,73% dan kadar sari larut etanol 36,8%. Hasil karakterisasi ekstrak etanol kulit buah rambutan diperoleh kadar air sebesar 27,32%, kadar abu total 1,51%, kadar sari larut air 59,43% dan kadar sari larut etanol 79,96%. Skrining fitokimia menunjukan ekstrak etanol kulit buah rambutan mengandung senyawa alkaloid, tanin, flavonoid, triterpenoid dan saponin. Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukkan ekstrak etanol kulit buah rambutan memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri S. aureus dan E. coli. Zona hambat terbesar terhadap bakteri S. aureus diperoleh pada konsentrasi 30% yaitu 20,73 mm dan terhadap bakteri E. coli diperoleh pada konsentrasi 5% yaitu 10,8 mm. Kata kunci: Ekstrak etanol kulit buah rambutan, Nephelium lappaceum L., uji aktivitas antibakteri, Staphylococcus aureus, dan Escherichia coli.