Penelitian ini bertujuan mengkaji teknik pengawetan menggunakan metode pengeringan beku (freeze drying) terhadap konsentrasi hormon estradiol pada cairan folikel ovarium sapi aceh. Cairan folikel diaspirasi dari 30 pasang ovarium (60 buah) yang dikoleksi dari 30 ekor sapi aceh betina di Rumah Potong Hewan (RPH) Kota Banda Aceh. Pengeringan beku dilakukan menggunakan mesin freeze dryer (Christ®, Gamma 1-20) pada suhu -40oC dengan tekanan vakum 1.030-0.630 mbar, dilakukan selama 72 jam. Data konsentrasi hormon estradiol pada cairan folikel segar dan cairan folikel yang telah dikering bekukan dianalisis menggunakan uji T berpasangan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa setelah pengeringan beku rataan volume sediaan freeze drying tidak berbeda jauh dengan volume sediaan segar. Rataan cairan folikel sediaan kering yang diperoleh sebesar 155,3 g dari sediaan segar sebanyak 200 μl/sampel. Rataan konsentrasi estradiol cairan ovarium segar dan kering masing-masing sebesar 36,59±8,08 ng/ml dan 33,91±7,31 ng/ml atau menurun sebesar 3,4%. Akan tetapi, hasil analisis statistik rataan konsentrasi estradiol pada sediaan segar dan kering tidak berbeda nyata (p>0,05). Dapat disimpulkan bahwa pengeringan beku cairan folikel sapi aceh tidak berpengaruh pada konsentrasi hormon estradiol.