Limbah medis merupakan limbah yang berbahaya, beracun, dan infeksius yang memerlukan pengelolaan limbah medis yang baik. Petugas medis memegang peranan penting dalam pengelolaan limbah medis. Pengetahuan, sikap, dan perilaku petugas medis akan menentukan hasil pengelolaan limbah medis. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui adanya pengaruh pemberian edukasi terhadap pengetahuan, sikap, dan perilaku petugas medis dalam pengelolaan limbah medis padat di RSUD dr. Zainoel Abidin Banda Aceh. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah Quasi Experimental Design. Sampel penelitian ini adalah petugas medis RSUD dr. Zainoel Abidin Banda Aceh sejumlah 94 orang yang dibagi menjadi kelompok perlakuan dan kontrol. Penelitian ini dilakukan pada tanggal 28 Desember 2017 - 5 Januari 2018. Pengetahuan, sikap, dan perilaku petugas medis diukur dengan wawancara menggunakan kuesioner pengelolaan limbah medis. Penelitian ini menggunakan uji komparasi Wilcoxon dengan nilai α sebesar 0,05 dan confidence interval sebesar 95%. Hasil dari penelitian ini didapatkan pada kelompok perlakuan, hasil uji komparasi Wilcoxon menunjukkan pada aspek pengetahuan nilai p-value sebesar 0,000, pada aspek sikap nilai p-value sebesar 0,000, dan pada aspek perilaku nilai p-value sebesar 0,000, sehingga pada penelitian ini terdapat pengaruh pemberian edukasi terhadap pengetahuan, sikap, dan perilaku petugas medis dalam pengelolaan limbah medis padat di RSUD dr. Zainoel Abidin Banda Aceh.