Uji aktivitas senyawa antibakteri ekstrak n-heksana dari daun Ketepeng Cina (Cassia alata) telah dilakukan. Daun C. alata dimaserasi dengan pelarut n-heksana diperoleh ekstrak n-heksana 31,79 g (3,97%). Ekstrak n-heksana daun C. alata dipisahkan komponen-komponenya dengan kromatografi cair vakum, didapatkan 7 fraksi masing-masing adalah fraksi A(4,83 g), fraksi B( 5,18 g), fraksi C(1,46 g), fraksi D(1,86 g), fraksi E(2,08 g), fraksi F(0,81 g) dan fraksi G(0,67 g). Ekstrak kasar dan fraksi-fraksi yang diperoleh diuji aktivitas antibakteri terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus menggunakan metode difusi agar dengan konsentrasi 5, 10 dan 20%. Kontrol positif yang digunakan kloramfenikol. Fraksi yang paling aktif terhadap bakteri uji adalah fraksi G dengan konsentrasi 20% zona hambat yang dihasilkan pada bakteri E.coli sebesar 8,3 dan 20 mm terhadap bakteri S. aureus. Berdasarkan hasil uji fitokimia, fraksi G memiliki kandungan metabolit sekunder golongan steroid yang diduga aktif terhadap bakteri E. coli dan S. aureus. Kata Kunci : Ketepeng Cina (Cassia alata), antibakteri, ekstrak n-heksana, metabolit sekunder.