Penelitian ini bertujuan mengetahui pengaruh frekuensi penampungan semen terhadap kualitas spermatozoa ayam bangkok. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Reproduksi Fakultas Kedokteran Hewan Unsyiah pada bulan Desember 2015 sampai Januari 2016. Sembilan ekor ayam bangkok jantan berumur 10-12 bulan dibagi menjadi tiga kelompok perlakuan yaitu penampungan semen satu kali per minggu (A), dua kali per minggu (B), dan tiga kali per minggu (C). Pengamatan kualitas semen meliputi evaluasi makroskopis (warna, ph, volume, dan konsistensi semen), dan evaluasi mikroskopis (gerakan massa, motilitas, konsentrasi dan abnormalitas) menurut metode BIB Lembang. Data yang diperoleh dianalisis dengan Analysis of Variant (ANOVA). Hasil pengamatan kualitas semen ayam bangkok untuk seluruh peubah yang diamati tidak menunjukkan perbedaan nyata terhadap ketiga frekuensi penampungan (P>0,05). Penampungan semen satu kali per minggu, dua kali per minggu, dan tiga kali per minggu menghasilkan kualitas semen ayam bangkok yang sama. Dapat disimpulkan bahwa frekuensi penampungan semen tidak berpengaruh terhadap kualitas spermatozoa ayam bangkok.