Keberhasilan pembinaan Perilaku Hidup Bersih dan Sehat (PHBS) di Indonesia hanya mencapai kurang dari 70% pada tahun 2014. Pelaksanaan program PHBS di Provinsi Aceh berada pada posisi ke-3 terendah dengan persentase 30,33%. PHBS yang kurang baik merupakan salah satu faktor risiko yang dapat menyebabkan masalah kesehatan diantaranya adalah diare. Kasus diare di Aceh berada pada urutan ke-5 terendah dengan persentase 9,3%. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui hubungan pengetahuan dan praktik PHBS terhadap kasus diare pada pemulung di Desa Gampong Jawa, Kota Banda Aceh, Provinsi Aeh. Jenis penelitian analitik dengan desain cross sectional. Subjek penelitian adalah 43 orang yang dipilih dengan teknik total sampling. Responden merupakan pekerja pemulung di Tempat Pembuangan Akhir (TPA) Desa Gampong Jawa, Kota Banda Aceh, Provinsi Aceh. Analisis data dilakukan secara univariat dan bivariat dengan uji analisis bivariat menggunakan uji Mann-Whitney. Hasil penelitian univariat menunjukkan dari 43 responden didapatkan persentase pengetahuan PHBS 60% dengan kategori baik, praktik PHBS 40% dengan kategori baik, dan kasus diare sebanyak 30%. Hasil analisis bivariat menunjukkan tidak terdapat hubungan yang bermakna (p value = 0,306) antara pengetahuan PHBS terhadap kasus diare dan tidak terdapat hubungan bermakna (p value = 0,253) antara praktik PHBS terhadap kasus diare pada pemulung di Desa Gampong Jawa, Kota Banda Aceh, Provinsi Aceh. Kesimpulan dari penelitian ini didapatkan tidak ada hubungan yang bermakna antara pengetahuan dan praktik PHBS terhadap kasus diare pada pemulung di Desa Gampong Jawa, Kota Banda Aceh, Provinsi Aceh, namun demikian penyebab kasus diare pada pemulung tersebut bisa juga disebabkan dengan adanya faktor lain. Kata Kunci : Perilaku Hidup Besih dan Sehat (PHBS), Pengetahuan, Praktik, Diare