Penyediaan air bersih yang aman dan berkualitas menjadi masalah yang perlu diperhatikan di seluruh dunia. Air merupakan salah satu sarana dan media yang baik untuk penyebaran berbagai macam penyakit. Di Indonesia umumnya sumber air bersih berasal sumur gali dan salah satu sumber pencemarnya ialah septic tank. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui hubungan jarak sumur gali dengan septic tank terhadap kualitas air bersih secara mikrobiologi di Kecamatan Muara Batu Kabupaten Aceh Utara. Penelitian ini bersifat analitik laboratorik menggunakan desain cross sectional dengan jumlah sampel 30. Metode pemeriksaan menggunakan membran filter. Data disajikan dalam bentuk tabel univariat dan bivariat. Berdasarkan hasil penelitian jumlah bakteri koliform didapatkan sangat bervariasi mulai dari tertinggi yaitu 313/100ml air yang ditemukan pada sampel nomor 12 sedangkan yang terendah 86 CFU/100ml air pada sampel nomor 30, begitu pula jarak yang didapatkan juga cukup bervariasi yang terjauh berjarak 25,3 meter dan yang terdekat adalah 4,7 meter. Hasil analisis statistik dengan menggunakan Korelasi Pearson didapatkan bahwa nilai p lebih kecil dari α (p=0,00) artinya terdapat korelasi yang bermakna antara jarak sumur gali dengan jumlah bakteri koliform (r = −0,735) dengan arah korelasi negatif. Jadi dapat disimpulkan bahwa terdapat hubungan yang bermakna antara jarak sumur gali dengan septic tank terhadap kualitas air bersih secara mikrobiologi di Kecamatan Muara Batu Kabupaten Aceh Utara. Kata kunci: sumur gali, septic tank, mikrobiologi, kualitas air