Penelitian ini bertujuan mengetahui aktivitas selulase saluran pencernaan ayam broiler setelah diberi penambahan ampas kedelai dan bungkil inti sawit yang difermentasi A.niger (AKBIS Prob) dalam ransum. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap faktorial, yang terdiri dari dua faktor yaitu faktor konsentrasi dan lama pemberian AKBIS Prob. Sebanyak 24 ekor ayam broiler dipelihara dengan penambahan pakan dalam 4 perlakuan dan 3 pengulangan dengan kombinasi pakan tambahan yaitu P0 (pakan komersil), P1 (pakan komersil dan 2% AKBIS Prob), P2 (pakan komersil dan 4% AKBIS Prob) dan P3 (pakan komersil dan 6% AKBIS Prob). Preparasi usus ayam dilakukan pada hari ke 22 dan 36 hari, lalu diekstraksi dan dideteksi keberadaan serta diukur aktivitas selulase. Penambahan AKBIS Prob 2,4 dan 6% tidak mempengaruhi (P>0,05) keberadaan dan aktivitas selulase usus halus dan usus besar, sedangkan lama pemberian mempengaruhi sangat nyata (P0,05) keberadaan dan aktivitas selulase. Pemberian AKBIS Prob dalam ransum selama 22 hari dengan konsentrasi 4% dapat meningkatkan keberadaan dan aktivitas selulase usus halus saluran pencernaan ayam broiler.