Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan antimikroba tumbuhan sarang semut(Myrmecodia sp.) terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Salmonella sp. dengan mengukur zona hambat yang terbentuk. Rancangan penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola searah. Sampel yang digunakan adalah fraksi air tanaman sarang semut konsentrasi 25% (P2), 50% (P3), dan 75% (P4) dengan kontrol positif berupa antibiotik amoxycillin dan kontrol negatif berupa akuades.Data dianalisis dengan Analisis Varian (ANAVA)dankemudiandilanjutkandenganuji t. Kemampuan antimikroba tumbuhan sarang semut (Myrmecodia sp.) dengan pengukuran zona hambat yang terbentuk, pada biakan Escherichia coli menunjukkan rata-rata luas zona hambat yang terbentuk pada P0, P1, P2, P3, dan P4 secara berurutan adalah 0; 18,76; 5,96; 6,4; dan 7,8 mm. Pada biakan Salmonella sp. rata-rata zona hambat yang terbentuk adalah 0; 33,63; 7,73; 10,5; dan 11,56 mm.Hasil analisis menggunakan ANAVA terhadap masing-masing perlakuan menunjukkan adanya pengaruh konsentrasi terhadap luas zona hambat yang terbentuk pada biakan bakteri Escherichia coli dan Salmonella sp.Hasilanalisisdenganuji t pada P2, P3, dan P4 menunjukkansifatantimikrobatumbuhansarangsemutadalahberefeklebihbaikpadabiakanSalmonella sp. Disimpulkan bahwa fraksi air tumbuhan sarang semut memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan mikroba Escherichia coli dam Salmonella sp. Kata kunci : fraksi air, zonahambat, sarang semut (Myrmecodia sp.), Escherichia coli, Salmonella sp.