ABSTRAK Klebsiella pneumonia merupakan salah satu penyebab infeksi nosokomial yang menjadi ancaman serius di lingkungan rumah sakit. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan tanaman biduri (Calotropis gigantea W.) sebagai alternatif pengobatan tradisional yang memiliki efek antibakteri sehingga dapat diketahui pengaruh ekstrak daun biduri terhadap pertumbuhan Klebsiella pneumonia. Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Rancangan penelitian ini terdiri dari 6 perlakuan, yaitu 4 variasi konsentrasi ekstrak 25%, 50%, 75%, dan 100% dan 2 kontrol (kontrol positif yaitu ciprofloxacin dan kontrol negatif yaitu Dimethyl sulfoxide (DMSO) 10%). Hasil uji menunjukkan bahwa ekstrak daun biduri memiliki pengaruh terhadap pertumbuhan Klebsiella pneumonia yang ditandai dengan terbentuknya zona bening yang diameter rata-rata secara berurut yaitu 6,25 mm, 7,5 mm, 8,75 mm, dan 9,75 mm. Hasil penelitian yang diperoleh dijabarkan berdasarkan klasifikasi respon hambat menurut Morales. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan ANOVA (Analysis of Variance) dan dilanjutakan dengan Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) (p < 0,05). Berdasarkan analisis data yang dilakukan terdapat pengaruh ekstrak metanol daun biduri dalam menghambat pertumbuhan Klebsiella pneumonia dan semakin tinggi konsentrasi yang diberikan maka diameter zona hambat yang dihasilkan akan semakin besar. Kata kunci: Calotropis gigantea W., antibakteri, Klebsiella pneumonia, pneumonia ABSTRACT Klebsiella pneumonia is one of cause nosokomial infection become serious threat in hospital environment. The aim of this study is to develop the plant of biduri (Calotropis gigantea W.) as alternative traditional medicinal which have antibacterial effect that influence of biduri’s leaf extract to growth of Klebsiella pneumonia. This study is experimental research with Completely Randomized Design (RAL). This study consisted by 6 treatment, there are 4 variations of extract concentration 25%, 50%, 75% and 100% and 2 controls (positive control group is ciprofloxacin and negative control group is Dimethyl sulfoxide (DMSO)10%). The result in this study indicated that biduri’s leaf extract own the influence to growth of Klebsiella pneumonia marked with formed of transparent zone with the average of diameter respectively were 6,25 mm, 7,5 mm, 8,75 mm and 9,75 mm. The result of research clarify base on classification respon pursue according to Morales. The analytical data using ANOVA (analisys Of Variance) and followed by Different Test of Smallest Reality (BNT) (p < 0,05). Pursuant to the data analysis conducted by there are influence of biduri’s leaf extract to growth of Klebsiella pneumonia and higher concentration extract whice given will make higher inhibition diameter zone. Keyword: Calotropis gigantea W., antibacterial, Klebsiella pneumonia, pneumonia