Vitamin E merupakan salah satu jenis vitamin yang sangat baik dalam meningkatkan fungsi reproduksi. Vitamin E mampu mempertahankan fertilitas yang berkaitan erat dengan produksi hormon testosteron. Penelitian ini bertujuan untuk mengamati pengaruh penambahan vitamin E dalam berbagai dosis terhadap kadar hormon testosteron yang terkandung dalam sampel serum darah ayam kampung jantan (Gallus domestica). Sampel yang digunakan adalah serum darah ayam kampung jantan sebanyak 20 ekor dengan umur berkisar 12-15 bulan dan bobot badan antara 1,5-2,0 kg yang diberikan vitamin E dengan dosis 0 mg (P0), 10 mg (P1), 20 mg (P2) dan 30 mg (P3). Pemeriksaan hormon testosteron pada penelitian ini menggunakan uji Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Penelitian ini menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap dengan 4 perlakuan dan 5 ulangan. Hasil dianalisis dengan menggunakan Analisis Varian (ANAVA) dan dilanjutkan dengan Uji Jarak Ganda Duncan (UJGD). Hasil pengukuran kadar hormon testosteron menunjukkan ada perbedaan nyata (P