Penelitian ini bertujuan mengetahui teknik preparasi dan penyimpanan sampel darah yang tepat untuk analisis testosteron menggunakan metode ELISA. Sampel yang digunakan adalah darah yang dikoleksi dari 10 ekor kambing kacang di Desa Lamreh. Penelitian ini terdiri dari 3 percobaan. Percobaan 1, mensentrifugasi darah dalam waktu berbeda yaitu < 3 jam=S0, 6 jam=S6, 12 jam=S12, dan 24 jam=S24. Percobaan 2, preparasi darah dengan teknik preparasi yang berbeda yaitu plasma disentrifugasi pada suhu 4°C=T1, plasma disentrifugasi tanpa pengaturan suhu=T2, serum dipreparasi pada suhu 4°C=T3, dan serum dipreparasi pada suhu ruang=T4. Percobaan 3, menyimpan serum pada tempat berbeda (stainless steel thermos, ice box, dan styrofoam box) dengan lama penyimpanan 2, 4, 6, 8, 10 hari pada suhu ruang. Data percobaan 1 dan 3 dianalisis menggunakan uji t (paired sample t test). Data percobaan 2 dianalisis menggunakan analisis sidik ragam (one way repeating) ANOVA. Hasil percobaan 1 diperoleh rata-rata (±SD) konsentrasi testosteron perlakuan S6, S12, S24 (5,01±1,58; 4,91±1,28; 4,20±1,46 ng/ml) lebih rendah dibandingkan kontrol/S0 (5,09±1,46 ng/ml). Konsentrasi testosteron pada S24 lebih rendah 17,35% dan berbeda nyata (P0,05). Hasil Percobaan 3, lama penyimpanan serum dalam thermos dan ice box selama 2-10 hari tidak berbeda nyata (P>0,05) dengan kontrol (serum yang disimpan di freezer), sedangkan penyimpanan pada styrofoam berbeda nyata (P