Penggunaan tumbuhan alami yang berkhasiat obat mengalami perkembangan yang pesat. Pare (Momordica charantia) merupakan tumbuhan yang tumbuh di daerah tropis dan buahnya banyak dikonsumsi sebagai sayur oleh masyarakat luas. Buah Pare mengandung sejumlah senyawa kimia yang digunakan untuk mengobati berbagai macam penyakit. Beberapa diantaranya adalah flavonoid, alkaloid, saponin dan tanin yang berfungsi sebagai antibakteri. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui daya hambat ekstrak buah Pare terhadap pertumbuhan bakteri Multidrug-Resistant Pseudomonas aeruginosa. Buah Pare diekstraksi dengan menggunakan pelarut etanol 96% dengan metode maserasi. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap yang terdiri dari 4 kelompok perlakuan dan 1 kelompok kontrol dengan 5 kali pengulangan. Kelompok perlakuan terdiri dari konsentrasi ekstrak 1 g/ml, 2g/ml, 3 g/ml dan 4 g/ml. Kelompok kontrol adalah kontrol negatif (CMC 1%). Uji daya hambat dilakukan dengan metode difusi cakram Kirby-Bauer. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah Pare memiliki daya hambat pada konsentrasi 1 g/ml, 2g/ml, 3 g/ml dan 4 g/ml terhadap pertumbuhan bakteri Multidrug-Resistant Pseudomonas aeruginosa dengan diameter zona hambat rata-rata berturut-turut 8,9 mm, 9,9 mm, 11,9 mm dan 13,5 mm. Hasil analisis data dengan menggunakan Analysis Of Variance (ANOVA) dan dilanjutkan dengan Uji Duncan (p < 0,01) menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah Pare memiliki daya hambat yang sangat nyata terhadap pertumbuhan Multidrug-Resistant Pseudomonas aeruginosa dan semakin tinggi konsentrasi, semakin luas zona hambat yang terbentuk.