Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui persentase motilitas dan viabilitas spermatozoa beberapa jenis ayam lokal yang dipelihara secara semi tradisional. Dalam penelitian ini digunakan sembilan ekor ayam lokal jantan berumur 1-1,5 tahun yang dibagi dalam tiga kelompok perlakuan yaitu ayam kampung (K1), ayam kate (K2), dan ayam bangkok (K3), setiap kelompok terdiri dari tiga ekor ayam sebagai ulangan. Penampungan semen dilakukan dengan metode massase dan dilakukan pemeriksaan motilitas dan viabilitas spermatozoa. Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dan dianalisis dengan analisis varian (ANAVA). Rataan ±SD persentase motilitas dan viabilitas spermatozoa K1,K2,dan K3 tidak berbeda secara nyata (P>0,05). Persentase motilitas dan viabilitas spermatozoa K1, K2, dan K3 secara berurutan adalah 92,33 ± 1,89 %; 90,17 ± 3,01 %; 93,00 ± 1,80 % dan 98,50 ± 0,5 %; 97,50 ± 0,5 %; 97,33 ± 0,76 %. Dapat disimpulkan bahwa jenis ayam tidak berpengaruh terhadap persentase motilitas dan viabilitas spermatozoa.